CARACTERIZACIÓN DE LA ACTIVIDAD
MITOCONDRIAL DE LAS FIBRAS MUSCULARES ESTRIADAS POR LA REACCIÓN
NADH (TR) EN FIBRAS MUSCULARES CON ATROFIA MUSCULAR POR DESUSO EN LA
ESPECIE CANINA.
Dra M. Mercado 1 , MV G.J. Larotonda 2
, MV C . Pallares .1
1. Área Enfermedades Quirúrgicas. Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad de Buenos
Aires .República Argentina. mmercado@fvet.uba.ar
2 .Área de salud y
producción equinas Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad de Buenos
Aires .República Chorroarín 280 , CABA lavetlab@gmail.com
Introducción.
La contracción muscular
requiere grandes cantidades de energía ,
siendo dentro de las mitocondrias donde
se llevan a cabo las reacciones bioquímicas productoras de este requerimiento , razón por la cual ,las
células musculares tienen muchas
mitocondrias para maximizar su
actividad.
La histoenzimología de los
músculos esqueléticos ha sido utilizada con éxito en la diferenciación de grupos de fibras funcionalmente distintas.
Esto se debe a la gran
concentración de enzimas oxirreductasas en las fibras musculares, principalmente las del tipo
diaforasa, como la nicotinamida adenina dinucleótida-tetrazolium reductasa
(NADH-TR).1-2 Esta reacción es usada como un marcador de las enzimas
mitocondriales. Cataliza la reducción de
compuestos de tetrazolio en presencia de NADH. Esta tinción
se basa en la capacidad de la enzima mitocondrial NADH deshidrogenasa para
transferir electrones a la sal de
tetrazolio incoloro, soluble y
convertirlo en un precipitado insoluble compuesto.3 Esto proporciona
una excelente tinción de la matriz intermiofibrilar.
El objetivo de este trabajo
es mostrar la utilidad de la técnica de NADH-TR en el diagnóstico de atrofia
muscular por desuso y su recuperación.
Materiales
y Métodos.
Se realizaron biopsias
escisionales de músculo cuadríceps femoral de 10 caninos según las técnicas de
extracción de muestras y fijación con nitrógeno
líquido publicadas en la
bibliografía (1) que habían sufrido
atrofia muscular por desuso por alguna lesión traumatológica, empleando
el miembro contralateral sano como
comparación.
Se procesaron los cortes
según la técnica NADH-T antes mencionada. Se observaron en microscopio a 100 X y 400 X
y 1000X
Resultados
y Discusión
Los cortes músculo adulto
normal presentan las fibras tipo I muy oscuras (azul) y las
fibras Tipo II pálidas. (Foto 1) En la atrofia se observó a los dos tipos de fibras con marcada
disminución de la tinción debido a una pérdida multifocal de la
actividad enzimática oxidativa.(foto 2)
Se pudo observar que, cuando
el músculo se recupera, la tinción vuelve a su coloración intensa.
Bibliografía
1.Dubowitz , V. y Brooke ,M.H. ( 1973) Muscle biopsy : A moderm approach. W. B.
Sanders Co. Ltd. London
2.Dubowitz , V., ( 1985 ) Muscle biopsy: a practical approach. 2nd
ed Bailliere Tindall, London
3.Pette, D ( 1985) ; metabolic heterogeneity of muscle fibers.
J.Exp. Biol. 115:179.
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