sábado, 17 de noviembre de 2012

Atrofia y mitocondrias musculares


CARACTERIZACIÓN DE LA ACTIVIDAD MITOCONDRIAL DE LAS FIBRAS MUSCULARES ESTRIADAS POR  LA REACCIÓN  NADH (TR) EN FIBRAS MUSCULARES CON ATROFIA MUSCULAR POR DESUSO EN LA ESPECIE CANINA.
Dra  M. Mercado 1   ,   MV G.J. Larotonda 2 , MV C . Pallares .1
 1.  Área Enfermedades Quirúrgicas. Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad de Buenos Aires .República Argentina. mmercado@fvet.uba.ar
 2 .Área de salud y producción equinas Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad de Buenos Aires .República  Chorroarín 280 , CABA  lavetlab@gmail.com

Introducción.
La contracción muscular requiere grandes cantidades de  energía , siendo dentro de  las mitocondrias donde se  llevan a cabo las reacciones  bioquímicas productoras de  este requerimiento , razón por la cual ,las células musculares tienen  muchas mitocondrias para maximizar  su actividad.
La histoenzimología de los músculos esqueléticos ha sido utilizada con éxito en la diferenciación  de grupos de fibras funcionalmente distintas.
Esto se debe a la gran concentración de enzimas oxirreductasas en las fibras  musculares, principalmente las del tipo diaforasa, como la nicotinamida adenina dinucleótida-tetrazolium reductasa (NADH-TR).1-2 Esta reacción es usada como un marcador de las enzimas mitocondriales. Cataliza la reducción  de compuestos de tetrazolio en presencia de NADH. Esta tinción se basa en la capacidad de la enzima mitocondrial NADH deshidrogenasa para transferir electrones  a la sal de tetrazolio  incoloro, soluble y convertirlo en un precipitado insoluble compuesto.3 Esto proporciona una excelente tinción de la matriz intermiofibrilar.
El objetivo de este trabajo es mostrar la utilidad de la técnica de NADH-TR en el diagnóstico de atrofia muscular por desuso y su recuperación.
Materiales y Métodos.
Se realizaron biopsias escisionales de músculo cuadríceps femoral de 10 caninos según las técnicas de extracción de muestras y fijación con nitrógeno  líquido  publicadas en la bibliografía (1) que habían sufrido  atrofia muscular por desuso por alguna lesión traumatológica, empleando el miembro  contralateral sano como comparación. 
Se procesaron los cortes según la técnica NADH-T antes mencionada. Se observaron en microscopio a  100 X y 400 X  y 1000X
Resultados y Discusión
Los cortes músculo adulto normal  presentan  las fibras tipo I muy oscuras (azul) y las fibras Tipo II pálidas. (Foto 1) En la atrofia se observó  a los dos tipos de fibras con marcada disminución  de la tinción  debido a una pérdida multifocal de la actividad enzimática oxidativa.(foto 2)
Se pudo observar que, cuando el músculo se recupera, la tinción vuelve a su coloración intensa.

Bibliografía
1.Dubowitz , V. y Brooke ,M.H. ( 1973) Muscle biopsy : A moderm approach. W. B. Sanders Co. Ltd. London
2.Dubowitz , V., ( 1985 ) Muscle biopsy: a practical approach. 2nd ed Bailliere Tindall, London
3.Pette, D ( 1985) ; metabolic heterogeneity of muscle fibers. J.Exp. Biol. 115:179.

No hay comentarios: